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8.8: Técnicas de Genética Molecular (Ejercicios) - Biología


Estos son ejercicios de tarea para acompañar el TextMap "Online Open Genetics" de Nickle y Barrette-Ng. Incluye el estudio de los genes, en sí mismos, cómo funcionan, interactúan y producen las características visibles y medibles que vemos en los individuos y poblaciones de especies a medida que cambian de una generación a la siguiente, con el tiempo y en diferentes entornos.

Preguntas de estudio:

8.1 ¿Qué información y qué reactivos necesitaría para usar la PCR para detectar el VIH en una muestra de sangre?

8.2 Un fragmento de PCR de 6,0 kpb flanqueado por sitios de reconocimiento para el HindIII La enzima de restricción se corta con HindIII luego ligado con un vector plásmido de 3 kb que también ha sido cortado con HindIII. Este plásmido recombinante se transforma en E. coli. A partir de una colonia se prepara un plásmido y se digiere con HindIII.

a) Cuando el producto de la HindIII la digestión se analiza mediante electroforesis en gel, ¿cuál será el tamaño de las bandas observadas?

B) ¿Qué bandas se observarían si el plásmido recombinante se cortara con EcoRI, que tiene un solo sitio, directamente en el medio del fragmento de PCR?

C) ¿Qué bandas se observarían si el plásmido recombinante se cortara con ambos EcoRI y HindIII ¿al mismo tiempo?

8.3 Si comenzara con 10 moléculas de plantilla de ADN de doble hebra, ¿cuál es el número máximo de moléculas que tendría después de 10 ciclos de PCR?

8.4 ¿Qué hay en un tubo de PCR al final de una reacción de amplificación exitosa? Teniendo esto en cuenta, ¿por qué normalmente solo ve una única banda afilada en un gel cuando se analiza mediante electroforesis?

8.5 Se puede usar una proteína de la cubierta de un virus en particular para inmunizar a los niños contra una infección adicional. Sin embargo, la inoculación de niños con proteínas extraídas de virus naturales a veces causa enfermedades mortales debido a la contaminación con virus vivos. ¿Cómo podría utilizar la biología molecular para producir una vacuna óptima?

8.6 ¿En qué se diferenciaría la clonación si no hubiera marcadores seleccionables?

8.7 La investigación muestra que una forma particular de cáncer es causada por una deleción de 200 pb en un gen humano particular que normalmente tiene una longitud de 2 kb. Solo se necesita una copia mutante para causar la enfermedad.

a) Explique cómo usaría la transferencia Southern para diagnosticar la enfermedad.

B) ¿Cómo aparecerían las manchas si se hibridaran y se lavaran a muy baja temperatura?

8.8 Consulte la pregunta 8.7.

a) Explique cómo detectaría la presencia de la misma deleción mediante PCR, en lugar de una transferencia Southern.

B) ¿Cómo aparecerían los productos de PCR si se recocieran a muy baja temperatura?

8.9 Tiene un fragmento de PCR para un gen del receptor olfativo humano (percepción de olores). Quieres saber qué genes puede tener un perro que estén relacionados con este gen humano. ¿Cómo puede utilizar su fragmento de PCR y el ADN genómico de un perro para averiguarlo? ¿Crees que los perros tienen más o menos de estos genes?

8.10 Agrega ligasa a una reacción que contiene un plásmido de extremos adhesivos y un fragmento de inserto de extremos adhesivos, ambos con extremos compatibles. Sin que usted lo supiera, alguien en el laboratorio dejó el stock de enzima ligasa fuera del congelador durante la noche y se degradó (ya no funciona). Explique en detalle lo que sucederá en su experimento de ligadura en esta situación si intenta transformarse con él.


Ver el vídeo: Problemas de Genética Molecular III. Huella Genética (Diciembre 2021).